Biochemical characterization of a microbial glucosyltransferase that converts sucrose to palatinose

Foi isolada de fruta deteriorada uma linhagem de klebsiella sp que transforma sacarose em palatinose. Foi verificado que a linhagem produz uma glicosiltransferase intracelular que transforma sacarose para palatinose. A enzima de Klebsiella sp foi purificada por fracionamento com sulfato de amônio e cromatografia em colunas de DEAE-Sephadex A-50 e CM-celulose. A enzima purificada apresentou ótima atividade a 35ºC e na faixa de pH 6,0 a 6,5. A enzima foi inibida por Hg2+ e Ag+, mas näo foi inibida por p-cloromercuribenzoato. Os valores de km e Vmax da enzima purificada foram respectivamente 120mM e 110µg palatinose formada por minuto por ml de enzima para o substrato sacarose. O peso molecular da enzima foi estimado em 74.000 Da. A enzima converteu 4 por cento (p/w) de sacarose para isomaltulose com uma eficiência de 86 por cento a 25ºC, pH 6,5

Mycelial production of Metarhizium anisopliae in liquid culture using different sources of carbon and nitrogen

A produçäo de micélio seco de Metarhizium anisopliae (CG 46, isolado da cigarrinha das pastagens Deois flavopicta) foi investigada. Várias fontes de carbono (dextrose e sacarose) e nitrogênio (extrato e água de levedura) foram testadas em cultivos em incubador rotativo (150 rpm). As melhores fontes de carbono e nitrogênio foram sacarose (4 por cento) e extrato de levedura (1 por cento), respectivamente. A concentraçäo celular (massa seca) e pH variaram de acordo com a concentraçäo inicial de conídios. A maior massa seca foi obtida com concentraçöes altas de conídios (> 10x7 conídios por ml). No fermentador, com meio de cultura à base de sacarose (4 por cento) e extrato de levedura (1 por cento), às 72 h de cultivo, a massa final foi 9.05 g/l com uma produtividade de 0,13 g.l(-1).h(-1). O consumo de açucar a 72 h de cultivo foi cerca de 69 por cento. Após rehidrataçäo (72 h, 25oC), o fungo produziu 1,63 x 10(10) conídios/g de micélio seco. A viabilidade dos conídios produzidos foi superior a 90 por cento. A utilizaçäo de água de levedura pode ser facilmente preparada a partir de sub-produtos de destilarias de álcool

Photosynthetic carbon reduction cycle metabolites and enzymes of sucrose and starch biosynthesis in developing Brassica pods.

Rate of net CO2 exchange and activities of the key enzymes of fru-2,6-P2, sucrose and starch synthesis and levels of certain intermediates of Calvin cycle were determined in Brassica pods at different stages of their development. The rate of net CO2 exchange, activities of FBPase, UDPG-pyrophosphorylase and SPS, and the contents of 3-PGA, DHAP, RuBP and UDPG increased up to day 21 after anthesis followed by a continuous decrease thereafter. However the content of fru-6-P started decreasing only after 28 days of anthesis. Changes in the levels of fru-2,6-P2 were closely associated with the changes in F6P 2-kinase activity rather than with F2,6-P2ase activity. Similarly, activities of ADPG-pyrophosphorylase and ADPG-starch synthetase closely followed the pattern of starch accumulation in pod tissues. These observations suggest that during the early phase of pod development (up to 21 days after anthesis), which is also the active phase for pod photosynthesis, carbon is mainly utilised for sucrose synthesis and that during the later phase of pod development (from day 21 to 42 after anthesis), there is shift in metabolic path of carbon from sucrose to starch.